quinta-feira, 5 de abril de 2018

Automação do laboratório de Hematologia

*Fonte: Google Imagens

  • Contagem de hemácias: 
As hemácias, também chamadas glóbulos vermelhos, são células do sangue que transportam oxigênio. A contagem de hemácias determina seu número em um volume determinado de sangue e é um dos exames incluídos no , usado com frequência em avaliações de rotina da saúde de uma pessoa.Método: automatizado com eventual estudo morfológico em esfregaços corados.
Os valores normais de hemácias variam, dependendo do tipo de amostra e da idade e sexo do paciente, da seguinte maneira:     
Homens adultos: 4,6 a 6,2 milhões de hemácias/ml de sangue venoso.Mulheres adultas: 4,2 a 5,4 milhões de hemácias/ml de sangue venoso.Crianças: 3,8 a 5,5 milhões de hemácias/ml de sangue venoso.Bebês a termo: 4,4 a 5,8 milhões de hemácias/ml de sangue capilar ao nascimento, iminuindo para 3,8 milhões de hemácias/ml na idade de 2 meses, e aumentando lentamente daí em diante.



  • Contagem de plaquetas:As plaquetas ou trombócitos, promovem a coagulação, ou seja, a formação de um coágulo hemostático em locais de comprometimento vascular.
    A contagem de plaquetas é o mais importante teste de rastreamento da função plaquetária. As contagens precisas são vitais.
Método: automatizado, com eventual estudo morfológico com esfregaços corados.
As contagens normais de plaquetas variam entre 150 a 450.000/ml.
  • Contagem de leucócitos:A contagem de leucócitos mede o número de leucócitos em um volume de sangue. Contagens anormais altas ou baixas podem sugerir a presença de doenças. Os leucócitos são produzidos na medula óssea, protegem o corpo contra infecções e participam de reações imunológicas. Quando há uma infecção, eles atacam e destroem as bactérias, os fungos ou os vírus causadores.
Método: automatizado, com eventual estudo morfológico em esfregaços corados.
De forma a assegurar um diagnóstico preciso, os resultados de testes diferenciais devem ser interpretados em relação à contagem de glóbulos brancos totais (4.000 a 10.000/ml). Para adultos, os valores absolutos e porcentagens normais incluem o seguinte:
Basófilos: 0 a 200/ml; 0 a 2%
Eosinófilos: 40 a 500/ml; 1 a 5%
Linfócitos: 880 a 4.000/ml; 22 a 40%
Monócitos: 120 a 1.000/ml; 3 a 10%
Neutrófilos: 1.800 a 7.500/ml; 45 a 75%.
Para crianças, os valores absolutos e porcentagens normais podem diferir. As porcentagens são as seguintes:
Basófilos: 0 a 2%
Eosinófilos: 1 a 5%
Linfócitos: 45 a 75%
Monócitos: 3 a 10%
Neutrófilos: 22 a 40%.

  • Diferenciação dos leucócitos: O que são leucócitos? 
    Também chamados de glóbulos brancos, os leucócitos são as células sanguíneas que estão envolvidas no processo de defesa do corpo. Eles funcionam juntamente com os macrófagos dos tecidos e o sistema linfático. Os leucócitos podem ser classificados em cinco tipos diferentes onde são levadas em consideração a morfologia nuclear, particularidades da coloração e suas funções. São subdividos também em duas categorias diferentes, onde são analisadas a ausência ou presença de grânulos em seu citoplasma, são elas: granulócitos e agranulócitos.
    Tipos de leucócitos:

    Neutrófilos
Conhecidos como polimorfonucleares por conta do formato do seu núcleo, que pode ter diferentes formas, onde pode apresentar de um a cinco umsr diferentes formas ormas conta do formato do seu n lobos. São divididos em bastões e segmentados e são particularmente associados com infecções bacterianas e outras reações inflamatórias.
Na forma de bastão ou bastonete, a cromatina é mais condensada e o núcleo adere formatos diferentes como a letra “S”, uma ferradura, entre outros.
Já em sua formação mais madura, os neutrófilos são chamados de segmentados, que é onde seus lóbulos estão unidos por delgados filamentos de cromatina. Seu núcleo possui cromatina grosseira e condensada.


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Eosinófilos
São leucócitos granulócitos maduros, que contém dois lobos e cerca de vinte granulações, onde são grosseiras e coradas cos laranja-castanho( acidófilas), que se coram pela eosina. Estão envolvidos nos processos de defesa relacionados a infecções parasitárias, principalmente, e alguns processos de reações alérgicas.
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Basófilos
São granulócitos com núcleo dificilmente visualizado devido a quantidade abundante de grânulos em seu citoplasma. Esses leucócitos também participam em respostas alérgicas, mas sua principal função consiste em liberar heparina nas áreas de invasão do organismo, para evitar a formação de coágulos e permitir a fácil migração dos neutrófilos para a defesa contra a invasão. Também liberam histamina no local da inflamação, que produz vasodilatação e aumenta o diâmetro dos poros dos capilares, facilitando a migração dos demais leucócitos.



Monócitos
É um leucócito agranulócitomononucleado, que possui um núcleo grande, oval ou denteado e centralizado; cromatina delicada e membrana delgada. Os monócitos circulantes são considerados imaturos. Ao deixar a corrente sanguínea, eles alcançam os tecidos, onde sofrem a fase final da sua maturação para originar os macrófagos
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Linfócitos
Os  linfócitos  são  divididos  em  dois  tipos  principais:  os  linfócitos  T,  que auxiliam na proteção contra as infecções virais e conseguem detectar e destruir algumas células cancerosas, e os linfócitos B, que se transformam em células produtoras  de  anticorpos  (plasmócitos). São leucócitos com núcleo grande e citoplasma sem granulações.
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  • Citometria de fluxo:

    A citometria de fluxo (FC) é uma técnica bem estabelecida pela utilização de laser óptico, tem como função realizar a separação, a contagem individual de células e detecção de biomarcadores em proteínas. A técnica por meio de um feixe de laser incidente faz a medição da dispersão e da fluorescência do feixe de laser refletido, a partir da amostra celular. Empregada em estudos de células em fluxo e por possuir amplas aplicações é denominada como citometria de fluxo multiparamétrica (FCM).

         Visto que essa técnica da citometria de fluxo vem ganhando cada vez mais           importância, tanto na área clínica, quanto da pesquisa. Qualquer célula ou partícula suspensa em meio líquido pode ter diversos parâmetros analisados simultaneamente, como:

·         Imunofenotipagem;
·         Proliferação Celular;
·         Vida e Morte Celular;
·         Viabilidade;
·         Apoptose e ciclo celular;
·         Comunicação Celular;
·         Quantificação de proteínas;
·         Marcação Intracelular e sinalização celular por citometria de Fluxo;
·         Marcação de Proteínas Intracelulares Clínica;
·         Caracterização de Células Tronco;
·         Monitoramento de HIV;
·         Diagnóstico de Leucemia;
·         Prova Cruzada de Transplantes;

Trazendo melhoria para hematologia, que foi uma das primeiras disciplinas médicas a se beneficiar das aplicações clínicas da citometria de fluxo. Algumas destas aplicações são atualmente utilizadas regularmente para o diagnóstico ou a seguinte terapêutica das diferentes afecções. Estas aplicações são relevantes também no estudo funcional das células sadias que coloca em evidência a natureza patológica das células analisadas.
Em oncologia, a detecção da célula patológica é a aplicação mais desenvolvida. Esta detecção mostra essencialmente sobre a medição de um conteúdo anormal de DNA no núcleo da célula tumoral.
A grande vantagem é a capacidade de avaliar em curto espaço de tempo, grande número de células com alta sensibilidade e especificidade proporcionando em seus resultados informações suficientes para diagnósticos precisos. Depois de ter sido introduzido definitivamente no mercado, várias empresas do setor de engenharia médica e biomédica começaram a realizar melhorias e ajustes para os aparelhos existentes.
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  • Histograma

É a curva de frequência da distribuição e tamanho dos
eritrócitos, com o volume na abscissa e a frequência na
ordenada. E quando a curva está situada à esquerda, denota-se
microcitose e à direita, macrocitose.
Interpretação
- Valores aumentados em policitemias
- Valores diminuídos processos anêmicos dediversas etiologias
 - Contagem em câmara de Neubauer oferece grande variabilidade de erro e dispêndio de tempo- automação
Índices hematimétricos
- VCM- volume corpuscular médio
- VCM= Ht x 10 / GV
- Correlaciona-se inversamente com o número de GV.
• Causas comuns de erro:
– Rouleaux
– Conservação prolongada in vitro ⇑ VCM
– Excesso EDTA- desidrata a célula-⇓VCM
– Valores normais: 82 a 92 fL
• Através do VCM classificam-se as anemias como:
– Macrocíticas
– Microcíticas
– Normocíticas
Alteração no VCM
• Microcitose
– Hemácias abaixo de 80 fL (adulto).
– Está associada à deficiência de ferro e talassemias.
•Macrocitose
– Hemácias acima de 100 fL (adulto).
– Está associada à deficiência de vitamina B12, quimioterapia,
doença hepática, hipotireoidismo e mieloma
Índices hematimétricos
• HCM – hemoglobina corpuscular média
– HCM= Hb x 10/GV (pg)
– Valores normais – 27 a 32 pg
• CHCM - concentração de hemoglobina
corpuscular média
– CHCM= Hb x 100
Ht
– Valoresnormais 32 a36%

• RDW (Red blood cell Distribution Width) –
expressão numérica da anisocitose
– Variação do volume das hemácias – contadores
automatizados
– Valores normais: 11-14,5
Anisocitose - Variação no tamanho das hemácias.

Ex: Histograma :
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  • O que são flags?

    Apesar dos grandes avanços observados nos analisadores hematológicos ainda existem problemas associados com amostras de sangue anormais. Pode-se facilmente compreender a dificuldade que um analisador encontra ao avaliar as células anormais incluindo blastos, granulócitos imaturos, linfócitos atípicos, leucócitos com inclusões citoplasmáticas e ate mesmo amostra com hemiparasitas. De modo geral os contadores são projetados para reconhecer células normais, e quando ha um numero significativo de células anormais com alterações na forma e no tamanho nuclear e celular, possíveis problemas de identificação das células serão encontrados , emitindo assim alerta suspeitos ou flags que indicam o mesmo. Tais alertas sugerem a presença de determinados tipos de celulares diferente dos normais. Portanto, é um resultado qualitativo que implica na necessidade de verificação, geralmente pela avaliação microscópica da lamina de sangue periférico



*Fonte: Google Imagens



  • Referências

    - https://labtestsonline.org.br/tests/contagem-de-hemacias
    http://www.labes.com.br/hemograma_completo.htm
    -http://cadernodefarmacia.blogspot.com.br/2012/10/contagem-de-hemacias-e-indices.html
    -Revista Médica Oficial do Hospital Universitário Da Universidade Federal de Juiz de Fora- Vols. 27(1), 27(2) e 27(3)- Janeiro a Dezembro/2001
    -http://www.scielo.br/pdf/rbhh/v26n3/v26n3a04
    -http://revista.unilus.edu.br/index.php/ruep/article/viewFile/39/u2008v5n8e39





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